一起來了解一下質(zhì)粒載體的概念

　　質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型，它存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物中，乃至于植物的葉綠體和線粒體等胞器中。
 

　　把一個有用的目的DNA片段通過重組DNA技術(shù)，送進受體細(xì)胞中去進行繁殖和表達(dá)的工具叫載體(Vector)。
 

　　細(xì)菌質(zhì)粒是重組DNA 技術(shù)中常用的載體。質(zhì)粒分子本身是含有復(fù)制功能的遺傳結(jié)構(gòu)。質(zhì)粒還帶有某些遺傳信息，所以會賦予宿主細(xì)胞一些遺傳性狀。其自我復(fù)制能力及所攜帶的遺傳信息在重組DNA操作，如擴增、篩選過程中都是極為有用的。
 

　　質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上為適應(yīng)實驗室操作而進行人工構(gòu)建的。與天然質(zhì)粒相比，質(zhì)粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標(biāo)記基因(如抗生素抗性基因)和一個人工合成的含有多個限制性內(nèi)切酶識別位點的多克隆位點序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量盡可能減少，以便于基因工程操作。
 

　　大多質(zhì)粒載體帶有一些多用途的輔助序列，這些用途包括通過組織化學(xué)方法肉眼鑒定重組克隆、產(chǎn)生用于序列測定的單鏈DNA、體外轉(zhuǎn)錄外源DNA序列、鑒定片段的插入方向、外源基因的大量表達(dá)等。
 

　　一個理想的克隆載體大致應(yīng)有下列一些特性:
 

　　⑴分子量小、多拷貝、松弛控制型;
 

　?、凭哂卸喾N常用的限制性內(nèi)切酶的單切點;
 

　　⑶能插入較大的外源DNA片段;
 

　?、染哂袃蓚€以上的遺傳標(biāo)記物，便于鑒定和篩選。
 

　　⑸對宿主細(xì)胞無害。常用的質(zhì)粒載體大小一般在1kb至10kb之間，如PBR322、PUC系列、PGEM系列、PET系列和pBluescript(簡稱pBS)等。